ELISA生物測定是一種具有高靈敏度、特異性和重現(xiàn)性的實驗性診斷方法。由于試劑穩(wěn)定、易于儲存、操作簡單、結果判斷客觀等特點，被廣泛應用于免疫學檢測的各個領域。 ELISA檢測試劑盒適用于人血清或血漿中抗人戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測的體外定性檢測。

中文名稱ELISA試劑盒

外文名 Elisa Kit

發(fā)表于 60 年代

特點：試劑穩(wěn)定、易儲存、易操作

。

如何工作

雙抗體夾心法

1. 包被：以 0.05 MPH 稀釋抗體至蛋白質含量為 1-10 μg/ml。 9. 含氧碳酸鹽涂層緩沖液。在 4 °C 下將 0.1 ml 添加到每個聚苯乙烯板的反應孔中過夜。次日，將溶液從孔中取出并用洗滌緩沖液洗滌3次，每次3分鐘。 （以下也清洗）。

2、加樣：將0.1ml特定稀釋度的待測樣品加入上述包被的反應液中，37℃孵育1小時。然后洗。 （同時創(chuàng)建空白孔、陰性對孔和陽性對照孔）。

3. 酶標抗體的加入：每個反應孔中加入新鮮稀釋的酶標抗體（滴定后稀釋）0.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小時并洗滌。

4、加入底物溶液顯色：在每個反應孔中加入0.1ml臨時配制的TMB底物溶液，37℃孵育10-30分鐘。

5. 反應結束：每孔加入 0.05 ml 2M 硫酸。

6、結果評價：在白色背景上可以用肉眼直接觀察結果。反應孔越深，陽性反應越強，陰性反應無色或極淡。表示“-"符號。您還可以測量 OD 值。在 450 nm（ABTS 顯色時為 410 nm）使用 ELISA 檢測器，使用空白對照孔至零，如果大于 OD 值的 2.1 倍，則測量每個孔的 OD 值。陰性對照為陽性。

間接法

1. 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至 1-10 μg/ml，每孔加入 0.1 ml，4 °C 過夜；

2.次日洗3次；

3、在上述反應孔中加入0.1mL稀釋的待測樣品（未知抗體），37℃孵育1小時，洗滌；

4.（空白、陰性、陽性對照同時進行）反應孔中加入新鮮稀釋的酶標二抗0.1mL；

5. 37°C孵育35-60分鐘，洗滌；

6.'最后用 DDW 洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法"中的4、5、6。

可概括四個方面：

1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。

2、研究抗酶抗體的合成。

3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。

4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

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